眾所周知,
色氨酸生產(chǎn)時(shí)早主要依靠化學(xué)合成法和蛋白質(zhì)水解法,但是隨著對微生物法生產(chǎn)色氨酸研究的不斷深入,這種方法已經(jīng)走向?qū)嵱貌⑶姨幱谥鲗?dǎo)地位。
微生物法大體上可以分為直接發(fā)酵法、微生物轉(zhuǎn)化法和酶法。近年來還出現(xiàn)了將直接發(fā)酵法與化學(xué)合成法相結(jié)合、直接發(fā)酵法與轉(zhuǎn)化法相結(jié)合生產(chǎn)色氨酸的研究。另外,重組DNA技術(shù)在微生物育種和酶工業(yè)上的應(yīng)用推動(dòng)了直接發(fā)酵法和酶法生產(chǎn)色氨酸的工業(yè)化進(jìn)程。
微生物轉(zhuǎn)化法使用葡萄糖作為碳源,同時(shí)添加合成色氨酸所需的前體物如鄰氨基苯甲酸、吲哚等,利用微生物的色氨酸合成酶系來合成色氨酸。這種方法同直接發(fā)酵法一樣,需要解除生物合成途徑中大部分酶所受到的反饋調(diào)節(jié),以使色氨酸能夠高濃度蓄積。
另外,所添加的前體物大都是抑制微生物生長的,因此添加量不可過高,一般采取分批少量添加的方法。同時(shí)可以篩選前體物的抗性突變株來提高前體物的添加量。
微生物轉(zhuǎn)化法的不足在于當(dāng)轉(zhuǎn)化液中前體物濃度較高時(shí),轉(zhuǎn)化率有所下降。另外,前體物的價(jià)格比較昂貴,不利于降低成本。
酶法是利用微生物中色氨酸生物合成酶系的催化功能生產(chǎn)色氨酸。這些酶包括色氨酸酶、色氨酸合成酶、絲氨酸消旋酶等。根據(jù)提供這些酶的微生物種類數(shù),可以分為雙酶菌法和單酶菌法兩種類型。
該法既可以直接加入細(xì)胞壁溶解酶使細(xì)胞破壁后再使用,也可以將所需的酶固定化后再使用,一般由酶源菌體的培養(yǎng)、菌體的分離洗滌、固定化和反應(yīng)幾個(gè)階段組成。